1. 流式图概述 (Overview)

流式细胞仪的分析速度极快（通常 >10,000 个细胞/秒）。每个细胞都会产生 FSC（大小）、SSC（颗粒度）以及多个荧光通道的信号。为了直观地展示这些海量数据，我们主要使用以下两种图谱：

• 流式直方图 (Histogram)：展示单参数信息。
• 流式散点图 (Dot Plot)：展示双参数信息（最常用）。
• 其他形式：如等高线图 (Contour Plot)、密度图 (Density Plot) 甚至 3D 图。

2. 流式直方图 (Histogram)

直方图的原理与统计学一致，用于分析单个通道的信号分布情况。

• X 轴：代表信号强度（如 FSC 大小，或 FITC 荧光强度）。
• Y 轴：代表细胞数量（Count）。

图1：典型的流式直方图（双峰分布示意）

案例解析： 假设我们分析 100 个细胞的 FSC（体积）信号。如果在直方图上出现了两个波峰：

• 左侧波峰（信号弱）：代表体积较小的细胞群（如淋巴细胞）。
• 右侧波峰（信号强）：代表体积较大的细胞群（如单核细胞）。

直方图能直观地告诉我们：样本中主要由哪几类大小不同的细胞组成，以及各自的比例。

3. 流式散点图 (Dot Plot)

散点图是流式分析中最强大的工具，它能同时展示两个通道的信息。图中的每一个点代表一个细胞。

3.1 FSC-SSC 散点图（物理图）

这是拿到数据后首先要看的图，用于根据物理特征对细胞进行初步分类。

• X 轴 (FSC)：细胞大小。
• Y 轴 (SSC)：细胞颗粒度/复杂程度。

经典案例：外周血白细胞分群
在 FSC-SSC 图上，白细胞通常会分为界限分明的三群：

• 淋巴细胞：体积小、颗粒少（位于左下角）。
• 单核细胞：体积中等、颗粒中等（位于中间）。
• 中性粒细胞：体积大、颗粒多（位于右上角）。

图2：外周血白细胞的 FSC-SSC 物理分群示意

3.2 门 (Gate) 的概念

3.3 荧光信号散点图（化学图）

当我们圈定目标细胞后，就可以分析其表面标记物（如 CD3, CD4）的表达情况。

• 坐标轴：通常是对数坐标 (Logarithmic Scale)。
• 原因：荧光信号的强弱差异巨大（阳性细胞比阴性细胞亮几百甚至几千倍），线性坐标无法容纳，必须用对数坐标才能同时看清阴性和阳性群。

图形解读：

• 圆形/团状：表示细胞群性质均一。
• 长条形：可能表示该标记物表达水平不均一，或者荧光补偿 (Compensation) 调节不当。

4. 群体信息与数据解读

流式细胞术关注的是统计学数据：

• 比例 (%)：阳性细胞占总细胞的百分比（如 CD4+ T细胞占 35%）。
• 平均荧光强度 (MFI)：阳性细胞群的平均亮度，反映蛋白表达水平的高低。